Polymerázové řetězové reakce (PCR) a STD testování
Obsah:
Analýza polymerázové řetězové reakce (PCR) je laboratorní technika. Účelem testování PCR je najít malé množství DNA ve vzorku za použití postupu známého jako zesílení. Během PCR amplifikace je DNA zájmu opakovaně kopírována, dokud ji nestačí pro analýzu a detekci. Například PCR může být použita k identifikaci malých množství DNA z organismů, které způsobují kapavky nebo chlamydie, které jsou přítomny ve vzorku moči.
Jak funguje PCR?
Je prvním krokem PCR primery. Jedná se o krátké sekvence DNA, které odpovídají koncům vzorku DNA, který se snažíte detekovat. Jsou to trik na nalezení, zesílení a detekci určitého kusu DNA. Ta část DNA může být použita k identifikaci patogenu. To může také být použito dělat věci jako detekovat geny pro odolnost proti antibiotikům.
Jakmile máte primery, dalším krokem v PCR je ohřívat vzorek tak, aby dvojvláknová DNA byla oddělena do dvou jednoduchých řetězců - to se nazývá denaturace. Poté jsou primery jsou kombinovány se vzorkovou DNA. Po tom, DNA polymerázy se používá k zahájení replikace DNA v místě primeru. Konečně se DNA zahřívá, aby se znovu oddělily prameny. Tím se celý proces PCR začne znovu.
Množství požadovaného segmentu DNA ve vzorku se exponenciálně zvyšuje s každým cyklem PCR. V prvním cyklu se jedna kopie stává dvěma. Potom se dvě kópie stávají čtyřmi, pak se stávají osmi, atd. Tento exponenciální růst znamená, že obecně je potřeba pouze 20 až 40 cyklů, aby bylo možné zjistit, zda je daná DNA přítomna. (Je-li přítomna DNA, stačí 20-40 cyklů, aby poskytl dostatečný vzorek pro analýzu).
Všechny kroky polymerázové řetězové reakce - denaturace DNA, aplikace primerů a prodloužení DNA - se dějí při různých teplotách. To znamená, že po sestavení počáteční směsi mohou být kroky řízeny procesem známým jako termocyklování. Termocyklování znamená, že teplota je udržována v potřebných úrovních po dostatečně dlouhou dobu pro každý krok. PCR je tedy účinným způsobem amplifikace množství cílové DNA. Ve skutečnosti to může být provedeno v jediné zkumavce s malou potřebou zásahu člověka.
Polymerázová řetězová reakce představovala revoluci v biologické technice, když byla poprvé vyvinuta na počátku 80. let. Stvořitel PCR, Kary Mullis, získal Nobelovu cenu za chemii za svou práci v roce 1993.
Proč PCR je relevantní pro testování STD
Polymerázová řetězová reakce a příbuzné techniky, jako je ligázové řetězové reakce, se prokazují, že mají stále větší význam pro testování STD. To proto, že tyto techniky mohou přímo identifikovat malé množství virové DNA nebo RNA ve vzorcích. Identifikace genetického kódu patogenu nevyžaduje, aby patogen byl živý - na rozdíl od bakteriální kultury nebo virové kultury. To také nevyžaduje, aby se infekce objevila před dávnou dobou, kdy lidé vyvinuli detekovatelnou protilátkovou reakci (způsob, jakým jsou infekce detekovány metodou ELISA). To znamená, že metody PCR mohou někdy detekovat onemocnění dříve než jiné testy. Dokonce lépe je možné detekovat pohlavně přenosné nemoci bez toho, aby bylo nutné věnovat pozornost udržování vzorků naživu nebo testování ve správný čas.
Uzavřené kinetické řetězové ramenní cvičení
Naučte se, jak provést uzavřené kinetické řetězové cvičení ve fyzické terapii, aby se zlepšila rovnováha manžety rotátoru a vlastnost.
Reakce a léčba reakcí na alergické reakce
Více než polovina lidí, kteří žijí v oblastech, kde se nacházejí mravenci, každoročně žijí. Zjistěte, jak jsou pro ně běžné alergie.
Genetické testování rakoviny plic: Molekulární testování mutací řidičů
Co je to genetické testování (molekulární profilování) nádorů rakoviny plic a jak identifikované mutace a přesmyky ovlivňují léčbu? Zjistit.